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Séparation et identification d’espèces chimiques par chromatographie
Objectifs : - Connaître le principe de séparation et d'identification des espèces chimiques par chromatographie. - Réaliser la chromatographie de colorants alimentaires et de l’huile essentielle de lavande.
La chromatographie consiste à entraîner les espèces chimiques d’un mélange le long d’un support vertical (phase fixe) grâce à un liquide appelé éluant (phase mobile). L’éluant monte le long du support en entraînant avec lui les différents constituants : les constituants migrent à des vitesses différentes selon l’espèce chimique. 1. Les colorants du sirop de menthe But : contrôler les colorant contenus dans du sirop de menthe par chromatographie.
Méthode pour réaliser la chromatographie : è Préparation de la cuve à chromatographie · Dans une cuve à élution (pot avec couvercle), verser sur une hauteur de 0.5 cm une solution composée d’eau salée et d’éthanol. Cette solution est appelé éluant. · Refermer la cuve avec son couvercle è Préparation du papier à chromatographie · Prendre une bande de papier filtre destinée à la chromatographie (4x8cm) dans le sens de la hauteur. Tracer un trait de crayon à papier à 1 cm du bord inférieur. Ce trait est appelé ligne de dépôt. · Sur ce trait tracer 3 petites croix à environ 1 cm d’intervalle. Sous la première croix inscrire la lettre J (pour jaune), sous la deuxième la lettre V (pour vert) et sous la troisième la lettre B (pour Bleu). · A l’aide de pics en bois, déposer une goutte des colorants jaune, vert et bleu sur chaque croix. Laisser sécher. è Elution · Placer délicatement le papier dans la cuve, en position verticale ; refermer le couvercle et laisser évoluer l’ensemble jusqu’à ce que l’éluant monte à 1 cm environ du haut de la plaque et repérer immédiatement par un trait de crayon à papier la hauteur maximale atteinte par l’éluant, ce trait est appelé front de l’éluant (ou front du solvant). Laisser sécher.
Répondre aux questions suivantes :
è Que peut-on en déduire sur la couleur verte du sirop de menthe ? ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 2. Evaluation expérimentale : Les colorants des M&M’s But : On souhaite savoir comment sont obtenues les couleurs des bonbons M&M’s (utilisation d’un seul colorant ou d’un mélange de colorants). Mode opératoire : choisir trois bonbons M&M’s de couleurs différentes et réaliser une chromatographie des colorants contenus dans ces bonbons en utilisant la même méthode que celle du paragraphe 1. Conseil : Pour extraire le colorant d’un bonbon, mettre une petite goutte d’eau distillée dans un récipient en porcelaine et frotter le bonbon jusqu’à ce que l’eau soit colorée et que le bonbon blanchisse. Evaluation expérimentale : L’expérience réalisée sera évaluée selon la grille suivante :
3. Chromatographie de l’huile essentielle de lavande Lors de l’hydrodistillation (voir TP de chimie n°3), nous avons obtenu de l’huile essentielle de lavande. L’aspect de cette huile ne nous permet pas de savoir si elle contient une ou plusieurs espèces chimiques. Nous allons donc réaliser la chromatographie de cette huile. Cependant pour mener à bien cette expérience il va falloir utiliser un nouvel éluant. L’adsorbant utilisé cette fois-ci est une plaque de CCM (Chromatographie sur Couche Mince). C’est une feuille de papier aluminium recouverte d’une fine couche de silice. L’éluant sera du dichlorométhane. 3.1. Protocole expérimental è préparation de la cuve : le niveau au fond de la cuve doit être de 5 à 8 mm. L’atmosphère de la cuve doit être saturée en vapeur d’éluant. Il faut donc la préparer à l’avance et bien la refermer. è Plaque de CCM : sur la ligne de dépôt on dépose dans l’ordre une goutte de linalol (repérée par la lettre L), une goutte d’acétate de linalyle (repérée par la lettre A), une goutte d’extrait de lavande (repérée par la lettre E) et une goutte d’extrait de lavande commercial (repérée par la lettre E’). è On procède à l’élution, on trace le front du solvant et on sèche la plaque.
Dans ce cas, les taches ne sont pas colorées ; deux moyens sont possibles pour les visualiser : Révélation UV : on place la plaque sous une lampe UV (Ultra Violet), les taches apparaissent Révélation par une solution : On plonge la plaque horizontalement et rapidement dans une solution de permanganate de potassium puis on sèche et on entoure les taches avec un crayon.
3.2. Exploitation
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